Москва
C 9:00 до 21:00 (МСК), бесплатно по России
Москва
Войти в профиль
Неверный логин, либо пароль.
Забыли пароль?
Вы не зарегистрированы?

ПАРВОВИРУС СОБАК

просмотров

4-1-2407.jpg

Автор: Никола Декаро, DVM, PhD

Департамент ветеринарной медицины, Университет Бари, Валенцано, Италия

Статья подготовлена по материалам журнала VETERINARY FOCUS26.1, 2016, «Неонатология и педиатрия»

Введение

Парвовирус собак является основной причиной строго гастроэнтерита у щенков в возрасте от 1 до 6 месяцев. Хотя этот вирус известен с конца 70-х годов, он до сих пор представляет большую угрозу для молодых собак из-за тяжести клинических симптомов и вследствие того, что материнские антитела (МА) могут мешать активной иммунизации и способны отрицательно влиять на программу вакцинации.

Парвовирус собак (CPV) - безоболочечный вирус небольшого размера (Рисунок 1) со сферическим капсидом (состоящим из трех белков, VP1, VP2 и VP3), содержащий линейную одноцепочечную ДНК, кодирующую два неструктурных (NS1 и NS2) и два структурных (VP1 и VP2) белка. VP2 является основным белком капсида и представляет собой антиген вируса (1, 2). Недавно был проведен пересмотр номенклатуры семейства парвовирусов (Parvoviridae), в результате чего CPV был выделен в отдельный вид Carnivore protoparvovirus 1 вместе с вирусом панлейкопении кошек (FPLV) и другими родственными парвовирусами плотоядных.

Еще одним препятствием для контроля заболевания является циркуляция полевых вариантов (CPV-2a, CPV-2b, CPV-2c), антигенно отличающихся от исходного штамма CPV 2, до сих пор содержащегося в большинстве коммерческих вакцин. Между CPV-2 и его антигенными вариантами есть всего несколько аминокислотных различий, но существует предположение, что вакцинация может обеспечить только частичную защиту, подвергая животных риску инфицирования полевыми штаммами и развития заболевания.

Актуальные проблемы, с которыми предстоит бороться, – повышенная встречаемость заболевания у взрослых собак и способность антигенных вариантов заражать кошек, вызывая клинические симптомы, идентичные панлейкопении кошек. Настоящая статья сосредоточена на клинических, патологических и диагностических аспектах инфекции CPV, с краткой информацией по текущей эпидемиологической обстановке в разных странах и обзором рекомендуемых протоколов вакцинации.

Ключевые тезисы
  • Парвовирус собак является основной причиной острого гастроэнтерита у молодых щенков и встречается по всему миру.
  • Три антигенных варианта полностью вытеснили исходный штамм; их распространенность неоднородна и зависит от географического региона.
  • Типичные клинические симптомы включают в себя рвоту, кровавую диарею и лейкопению; смертность в инфицированных питомниках и приютах для собак может достигать 60-70 %.
  • Внутриклинические диагностические тесты обладают слабой чувствительностью, и может потребоваться проведение дополнительных тестов с использованием методов на основе ПЦР.
  • Лечение в основном заключается в поддерживающей терапии, хотя было протестировано несколько противовирусных препаратов.
  • Вакцинация щенков до сих пор остается наиболее эффективной стратегией контроля инфекции, несмотря на возможные помехи со стороны материнских антител и предположительное несоответствие вакцинных и полевых штаммов.

4-2-2407.PNG

Эпидемиология

Исходный штамм CPV-2 появился в конце 1970-х годов и, вероятно, был вариантом штамма FPLV, ранее мутировавшим в неустановленном виде диких плотоядных животных. В начале 80-х годов исходный вирус был внезапно вытеснен двумя его антигенными вариантами, CPV-2a и CPV-2b, образовавшимися посредством 5 или 6 аминокислотных замен в капсидном белке VP2, а третий вариант, CPV-2c, был отмечен в Италии в 2000 г.

В настоящее время исходный штамм CPV-2, до сих пор использующийся в большинстве вакцинных препаратов, в полевых условиях больше не циркулирует, в то время как три его антигенных варианта неравномерно распространены по всему миру. В континентальной Европе варианты, по-видимому, циркулируют совместно, с преобладанием типов 2a и 2b в Португалии, Франции и Бельгии, типов 2a и 2c в Италии, типа 2a в Восточной Европе и типа 2c на Иберийском полуострове, а в Германии одинаково распространены все три варианта вируса. В Северной и Южной Америке выявлена частая встречаемость CPV-2b/2c и CPV-2a/2c, соответственно; в Азии и в островных государствах, таких как Великобритания, Австралия и Япония, превалируют типы 2a и 2b. Немногочисленные отчеты из Африки указывают на совместную циркуляцию трех штаммов на севере континента и высокую встречаемость CPV-2a и 2b на юге.

CPV может инфицировать домашних собак, а также волков и другие дикие виды плотоядных, у которых часто выделяют вирусы, средние между CPV-2 и CPV-2a. Исходный штамм CPV-2 мог инфицировать клетки кошек in vitro, но не in vivo; в отличие от него новые антигенные варианты способны инфицировать кошек, вызывая заболевание, неотличимое от панлейкопении кошек. Теоретически предрасположенности к инфекции CPV не существует. Крупные породы, такие как немецкая овчарка, лабрадор-ретривер, ротвейлер, аляскинский маламут и доберман, по всей видимости, находятся в группе повышенного риска, но это может быть связано с тем, что уровень МА у быстро растущих щенков крупных пород снижается быстрее, чем у более мелких собак. Кроме того, хотя инфицирование CPV и соответствующая болезнь в основном встречается у щенков моложе 6 месяцев, отмечается возрастающее число случаев тяжелых клинических симптомов у взрослых собак, часто вызванных инфекцией CPV-2c.

Кал инфицированных щенков является основным источником вируса в окружающей среде; вирус крайне устойчив и может сохранять контагиозность на протяжении недель или даже месяцев. Щенки, не получавшие лекарственной терапии, инфицируются ороназальным путем посредством прямого или непрямого контакта.

Патогенез

Тканями-мишенями для репликации вируса являются крипты кишечника и лимфоидные органы, но вирус может распространяться на все ткани. После попадания в организм животного CPV в основном размножается в лимфоидной ткани ротоглотки, тимуса, брыжеечных лимфатических узлов и пейеровых бляшек, вызывая обширный некроз, прежде чем распространиться в кровоток, обычно посредством инфицированных лимфоцитов. Виремия длится долго (вирус может обнаруживаться до 60 дней в ПЦР в реальном времени) и ведет к колонизации крипт тонкого кишечника, где активная репликация вируса вызывает быстрый лизис стволовых клеток. Прямым следствием является нарушение обновления эпителиальных клеток кишечных ворсинок, приводящее к диарее. Выделение вируса с калом начинается через 2-3 дня после инфицирования и длится до 45-50 дней, но высокие титры могут быть получены только в первые 7-10 дней. У новорожденных щенков (в возрасте до 2-3 недель) CPV способен размножаться в активно делящихся клетках миокарда, вызывая тяжелый миокардит, хотя в настоящее время такие случаи встречаются только эпизодически. По сравнению с исходным штаммом 2-го типа, антигенные варианты характеризуются более высокой патогенностью, меньшим инкубационным периодом (менее 4-5 дней), более тяжелыми клиническими симптомами, более высоким уровнем и продолжительностью выделения вируса, а также меньшей концентрацией вируса, требуемой для инфицирования собак. Ассоциированная инфекция с коронавирусом собак (CCoV) может ухудшать клинические симптомы, при этом CPV и CCoV инфицируют эпителий крипт и ворсинок кишечника, соответственно.

Клинические симптомы и патология

Как указывалось выше, инкубационный период исходного штамма CPV-2 длился до 7 дней, в то время как новым вариантам обычно требуется всего 3-4 дня для проявления клинических симптомов. В зависимости от возраста и иммунного статуса инфицированной собаки, инфекция CPV может принимать различные клинические формы, начиная с бессимптомной инфекции и заканчивая острым гастроэнтеритом и (крайне редко) миокардитом.

Бессимптомные инфекции

Бессимптомные инфекции обычно возникают у щенков со средним уровнем материнских антител (титры антител в реакции торможения гемагглютинации в диапазоне между 1:20 и 1:80), защищающих от явной болезни, но не от инфицирования. Отличия в уровнях материнских антител у щенков одного помета позволяют объяснить, почему у некоторых щенков проявляются тяжелые клинические формы заболевания, в то время как у других наблюдаются лишь некоторые клинические симптомы или их полное отсутствие. Взрослые собаки также могут подвергаться заражению с проявлением некоторых клинических симптомов или бессимптомно вследствие большей зрелости слизистых кишечника. Иногда отмечаются лишь смазанные симптомы, например, летаргия и потеря аппетита в течение 2-3 дней, наряду с умеренной транзиторной лейкопенией. Бессимптомные инфекции имеют особое значение для питомников и приютов для животных, где присутствие здоровых, но инфицированных животных может способствовать передаче вируса другим щенкам.

4-3-2407.PNG

Гастроэнтеральная форма

Это наиболее распространенная форма, вызываемая инфекцией CPV у щенков в возрасте от одного до шести месяцев, хотя существует растущее число свидетельств заболевания у взрослых собак. После 3-4 дней инкубации у щенков развивается анорексия, депрессия и рвота с последующей диареей, приводящей к сильному обезвоживанию. Диарея часто, хотя не всегда, кровавая, кал с прожилками крови или темного цвета из-за крови. Может присутствовать повышенная температура (40-41°C), но встречается не во всех случаях. Лейкопения, напротив, встречается часто, со снижением содержания лейкоцитов (WBC) ниже 2000-3000 клеток/мкл. Следует отметить, что абсолютное содержание лейкоцитов может быть в норме в случае вирусной лейкопении с сопутствующей нейтрофилией, вызванной оппортунистической бактериальной инфекцией. Эти бактерии часто усиливают клиническое течение болезни, вызывая дополнительные симптомы, приводящие к гибели животного, например, угнетение дыхания. Степень лейкопении определяется как прогностический фактор; отмечается, что у щенков с уровнем лейкоцитов ниже 1000 клеток/мкл шансы на выживание крайне низки. Смерть может наступить уже через два дня после появления клинических симптомов вследствие бактериальной диссеминации или диссеминированного внутрисосудистого свертывания крови. Уровень смертности может сильно варьироваться в зависимости от возраста и иммунного статуса животного; смертность у взрослых собак обычно составляет менее 1%.

Щенки, погибшие от парвовирусного энтерита, крайне обезвожены. При аутопсии видны обширные поражения желудочно-кишечного тракта, в основном охватывающие двенадцатиперстную кишку и далее тощую кишку. Наиболее часто встречается геморрагический гастроэнтерит; стенка кишечника обычно утолщена, с бледными очагами, а серозная поверхность может быть темно-красной или пурпурной, иногда покрыта фибрином. Кишечник может быть пустым, либо содержать темную (часто кровавую) массу или геморрагическую жидкость. Брыжеечные лимфатические узлы и пейеровы бляшки увеличены, набухшие, часто с множественными кровоизлияниями на корковом слое и на поверхности разреза (Рисунок 3). При гистопатологии тонкого кишечника наблюдается многоочаговый некроз крипт и внутриядерные тельца-включения, а в пейеровых бляшках, лимфатических узлах, селезенке и тимусе наблюдается обширное истощение лимфоцитов. При развитии бактериальных осложнений может наблюдаться отек легких и альвеолит.

4-4-2407.PNG

Миокардиальная форма

Острый миокардит часто встречался во время первой всемирной вспышки CPV, когда инфекция поражала популяцию собак, ранее не сталкивавшихся с вирусом, но на сегодняшний день в полевых условиях эта форма встречается лишь эпизодически. На самом деле, парвовирусный миокардит может развиваться только у щенков моложе 3-4 недель, когда синцитий миокарда активно делится и не защищен от размножения вируса. Однако сегодня, так как большинство сук были вакцинированы (или сталкивались с вирусом) и выработали устойчивый иммунитет, практически все щенки получают материнские антитела, защищающие их от инфекции парвовируса в первые недели жизни.

Парвовирусный миокардит характеризуется внезапной смертью инфицированных щенков. В некоторых случаях смерти предшествует появление симптомов со стороны желудочно-кишечного тракта и коротких приступов диспноэ, вокализации и рвоты. Некоторые животные могут быть клинически здоровыми, и патология сердца будет явно видна только на электрокардиограмме; в этой ситуации вирус предрасполагает к развитию у собаки дегенеративных заболеваний сердца, и спустя несколько недель или месяцев может развиться сердечная недостаточность. У щенков, восстановившихся после парвовирусного миокардита, развивается фиброз миокарда. Собаки, умершие от миокардиальной формы болезни, нередко находились в хорошей форме, и иногда единственным показателем при аутопсии является отек легких. В других случаях наблюдается дряблость стенок и дилатация камер пораженного сердца, с бледными очагами некроза на поверхности. Гистопатологически поражения миокарда включают в себя негнойный миокардит, многоочаговую инфильтрацию лимфоцитами и плазмоцитами и присутствие внутриядерных телец-включений.

Диагностический подход

Постановка диагноза инфекции CPV зачастую основана просто на присутствии зловонной и кровавой диареи, но следует подчеркнуть, что сходными симптомами могут обладать и другие патогены, и что парвовирусный энтерит часто протекает без геморрагии. Таким образом, во всех случаях требуется лабораторная диагностика либо для подтверждения, либо для исключения инфекции CPV.

Клиническая диагностика

Рвота и кровавая диарея, сопровождающиеся острой лейкопенией, позволяют с высокой долей вероятности подозревать инфекцию CPV. Однако дифференциальный диагноз также включает чуму собак, инфекционный гепатит собак, кишечный паразитоз и другие алиментарные нарушения. CCoV (Canine Coronavirus) обычно вызывает энтерит, не сопровождающийся кровотечением, но при некоторых условиях патоген может вызывать кровавую диарею, а высоковирулентные штаммы (пантропный CCoV) – системное заболевание и лейкопению.

Вирусологическая диагностика

Прямое обнаружение вируса может проводиться на кале больных собак, либо на тканях при аутопсии (кишечник, селезенка, лимфоузлы). На более поздних стадиях инфекции наиболее достоверным образцом ввиду длительной виремии будет кровь. Высокие уровни вируса выявляются во всех тканях, включая мозг, хотя максимальные титры обнаруживаются в лимфоидных тканях.

Для выявления CPV в кале существует ряд коммерческих наборов для внутриклинического анализа. Эти тесты выявляют (с одинаковой эффективностью) все три антигенных варианта и даже родственный вирус панлейкопении кошек. Однако они обладают низкой чувствительностью, пропуская до 50-60% CPV-положительных образцов, особенно на поздних стадиях инфицирования, когда вирус выделяется с калом в малых количествах, и/или в случаях, когда высокие титры антител CPV в просвете кишечника подавляют продуцирование жизнеспособного вируса. Реакция гемагглютинации (HA) и выделение вируса могут проводиться только в специализированных лабораториях и не обеспечивают существенно более высокую чувствительность, чем внутриклиническое тестирование.

В то же время, методы на основе ПЦР, выявляющие вирусную ДНК, обладают высокой чувствительностью и должны использоваться, по крайней мере, когда есть серьезные подозрения на парвовирус, но внутриклиническое тестирование щенка дало отрицательный результат. Кроме того, ПЦР-тесты были разработаны таким образом, чтобы отличать варианты CPV, а также вакцинные вирусы от полевых, что может оказаться полезным для разрешения споров между владельцами, ветеринарными врачами и производителями вакцин, когда диарея возникает у собаки через несколько дней после вакцинации от CPV. Действительно, доступные на рынке вакцины содержат модифицированные живые вирусы, которые размножаются в эпителии кишечника вакцинированных собак: вирус выделяется с калом (хотя в низких титрах и в течение более короткого периода времени, чем полевые штаммы), что может привести к выявлению CPV в кале вакцинированных собак и ошибочной постановке диагноза, в то время как клинические симптомы на самом деле вызваны другими энтеропатогенами. Более того, ПЦР-анализ может оказаться полезен для того, чтобы развеять предположения о развитии вирулентности у вакцинного штамма, если вскоре после вакцинации у животного развивается острый гастроэнтерит.

Серологическая диагностика

Несмотря на существование ряда тестов, серологическое тестирование не представляет диагностической ценности. Фактически, специфические антитела в сыворотке крови могут быть не связаны с активной инфекцией CPV, если собака раньше вакцинировалась от этого вируса или ранее с ним сталкивалась. Тем не менее, серологическое исследование полезно для оценки иммунологического статуса собаки в отношении CPV до и после вакцинации, а также для оценки снижения уровня материнских антител, чтобы рассчитать, когда можно прививать щенка от CPV без интерференции материнских антител. Серологическое исследование также важно для того, чтобы выяснить, среагировала ли собака на вакцинацию. Наиболее распространенным видом серологического исследования является реакция торможения гемагглютинации (HI), требующая привлечения подготовленного персонала и специальных субстратов, но только реакция нейтрализации вируса (VN) способна выявить защитные антитела и широко используется для оценки перекрестной нейтрализации вакцинного и полевого вируса.

Терапевтический подход

Несмотря на поддерживающий и неспецифический характер терапии, она зачастую благотворно влияет на уровень смертности при инфекции CPV. Основная задача терапии при парвовирусном энтерите заключается в восстановлении уровня жидкости и водно-электролитного баланса, а также в предотвращении развития сопутствующей инфекции оппортунистическими бактериями. Внутривенная инфузионная терапия раствором Рингера с добавлением глюкозы и калия нейтрализует гипогликемию и гипокалиемию. При отсутствии возможности регулярного мониторинга электролитов и уровня глюкозы в сыворотке крови будет адекватным эмпирическое добавление в/в жидкостей с хлоридом калия (20-40 мЭкв/л) и декстрозой (2,5-5%).

Парентеральные противорвотные препараты (например, хлорпромазин, ацепромазин, прохлорперазин, метоклопрамид, ондансетрон, доласетрон и маропитант) могут способствовать снижению потери жидкости и стресса у пациента, упрощая энтеральное питание. Однако следует обратить внимание, что а-адреноблокаторы могут усилить гипотензию у щенков с гиповолемией, в то время как прокинетики могут повышать риск инвагинации кишечника. Гастропротекторные средства и блокаторы Н2-гистаминовых рецепторов (циметидин, ранитидин) могут также оказывать благотворное действие.

4-5-2407.PNG

Для профилактики или лечения вторичных инфекций следует вводить противомикробные препараты широкого спектра действия. Для контроля грамотрицательных аэробных и анаэробных бактериальных инфекций, часто вызывающих осложнения при парвовирозе собак, лучше всего применять комбинацию пенициллина и аминогликозидных антибиотиков.

Для пациентов с нефропатией предпочтительнее использовать цефалоспорины третьего поколения, чем нефротоксичные аминогликозиды, а также следует избегать использования хинолонов для растущих собак. Если рвота прекратилась на 12-24 часа, не рекомендуется препятствовать потреблению пищи и воды больным щенком, так как существуют свидетельства того, что животные, получавшие легкоусвояемый коммерческий или домашний корм, восстанавливаются быстрее. Щенков с анорексией следует кормить подходящей диетой через назально-пищеводный или назально-желудочный зонд.

Переливание цельной крови или плазмы может помочь компенсировать потерю крови и белка, вызванную тяжелым энтеритом. Препарата с доказанной эффективностью в отношении инфекции CPV не найдено.

Введение гипериммунной плазмы или очищенных иммуноглобулинов может быть полезно в качестве профилактической меры для щенков, контактирующих с инфицированными животными, но свидетельств эффективности такой терапии для больных щенков нет. В действительности к моменту манифестации клинических симптомов вирус уже колонизовал целевые ткани, и уровни антител уже высоки. Молекулы, стимулирующие синтез лейкоцитов, как например, рекомбинантный гранулоцитарный колониестимулирующий фактор человека или собак, по некоторым сведениям сокращают продолжительность госпитализации и повышают уровень выживаемости, однако для подтверждения их эффективности необходимо проведение дальнейших исследований.

За последние годы ряд противовирусных препаратов был протестирован на эффективность против инфекции CPV: может оказаться эффективным противогриппозный препарат озельтамивир, но необходимы дальнейшие исследования. Исследования показали, что рекомбинантный интерфероны кошек снижал интенсивность клинических симптомов и смертность, только если лечение начиналось в кратчайшие сроки после инфицирования - условие, не воспроизводимое в реальной ситуации.

Контроль

Хотя результаты тестов подтверждают продолжительное выделение инфекционного вируса с калом, маловероятно, что он будет выделяться более 7-10 дней. Однако благодаря отсутствию оболочки вирус обладает исключительной устойчивостью, что затрудняет его уничтожение в окружающей среде, где он может сохраняться на протяжении нескольких недель или месяцев, приводя к дальнейшему распространению инфекции.

Обязательна строгая изоляция инфицированных щенков и тщательная дезинфекция. Каловые массы должны удаляться как можно быстрее, так как они являются основным источником вирусной контаминации окружающей среды.

Наиболее распространенные дезинфектанты неспособны инактивировать CPV, однако была доказана эффективность 5-10% раствора гипохлорита натрия. Все поверхности, способные выдержать обработку, должны замачиваться в растворе хлорной извести в течение как минимум 10 минут, прежде всего, конуры и больничные клетки, сильно загрязненные калом. Поверхности, не переносящие воздействие хлорной извести, должны подвергаться дезактивации паром.

Вакцинация

Интерференция материнских антител

Основной проблемой при вакцинации CPV являются материнские антитела, защищающие щенков от инфицирования полевыми штаммами, но мешающие активной иммунизации. Титры материнских антител зависят от уровня антител в сыворотке крови матери и объема потребленного щенками молозива. Соответственно, щенки от одной и той же суки могут иметь различные уровни материнских антител и, следовательно, могут быть чувствительны к инфекции CPV (и активной иммунизации) в разном возрасте. Вакцинация щенков с высоким уровнем материнских антител (титры HI > 1:20) может приводить к недостатку сероконверсии вследствие разрушения вакцинного вируса антителами молозива. Поскольку только титры HI > 1:80 считаются защитными от инфекции полевыми штаммами, существует так называемое «окно восприимчивости» - период, обычно длящийся 2-3 недели, в течение которого щенков нельзя вакцинировать, но при этом они могут быть инфицированы с последующим развитием болезни.

Для предотвращения интерференции при активной иммунизации вакцины должны вводиться щенкам только после исчезновения материнских антител. Для преодоления интерференции материнских антител рекомендованы различные стратегии вакцинации, включая вакцины с высоким титром и интраназальную вакцинацию. Повторное интраназальное введение моновалентных вакцин CPV было эффективно для уничтожения вируса в инфицированных питомниках (личное наблюдение).

Согласно рекомендациям Всемирной ассоциации ветеринарии мелких животных курс первичной вакцинации от CPV не должен заканчиваться до достижения возраста 14-16 недель, чтобы обеспечить защиту даже щенкам с длительным действием материнских антител. Рекомендуемый протокол включает три введения вакцины CPV в первый год жизни и ревакцинацию после одного года, с последующей ревакцинацией один раз в три года.

Вакцины CPV-2 и перекрестная защита от антигенных вариантов

Хотя окно восприимчивости является основной причиной активной циркуляции CPV среди вакцинированных животных, существуют также сомнения в полной эффективности вакцин на основе CPV 2-го типа против новых антигенных вариантов вируса. Большинство коммерческих вакцин готовятся с использованием старого штамма CPV-2, более не циркулирующего в природе, и результаты исследований подтвердили неспособность антител, выработанных против вакцинного вируса, полностью нейтрализовывать полевые штаммы CPV. Существует несколько лицензированных вакцин, содержащих вариант CPV-2b, и было бы желательно иметь вакцинные препараты с новым вариантом 2c, хотя эти три варианта способны обеспечивать эффективную перекрестную нейтрализацию друг друга.

ПОХОЖИЕ СТАТЬИ

Собаки
Парвовирус CPV-2 в питомниках собак
Что надо знать о парвовирусе CPV-2 в питомниках собак и как его предотвратить
Собаки
Парвовирусная инфекция
О парвовирусе собак и влиянии колострального иммунитета.
Мы используем данные файлы cookie, данные об IP-адресе и местоположении, разработанные третьими лицами для анализа событий на нашем сайте. Продолжая просмотр страниц сайта, вы принимаете условия его использования. Более подробные сведения можно посмотреть в Политике конфиденциальности.